Array-Technologien zum Nachweis von Pathogenen

Mit langjähriger Erfahrung entwickeln wir auf Nukleinsäuren beruhende Microarrays zur molekularen Diagnostik einer Vielzahl von Erregern. Unsere Aktivitäten umfassen den gesamten Workflow der Array-Entwicklung vom Sondendesign, über deren Immobilisierung im Kontaktprintverfahren bis hin zur Hybridisierung von Target-DNAs zur Fluoreszenz-basierten Identifikation der Erreger.

Das grundlegende Prinzip eines Microarrays oder Biochips ist die geordnete, punktförmige Immobilisierung von bis zu tausenden DNA-Sonden mit definierter Sequenz auf einem festen Träger.

Microarrays ermöglichen es so, eine Vielzahl von Genen bzw. Proteinen in einer einzigen biologischen Probe gleichzeitig zu untersuchen. Die einzelnen DNA/Protein-Spezies dienen dabei als Sensoren, die entsprechende Biomarker erkennen, um Aussagen über die Sequenz, Transkription, Expression oder auch Funktion dieser Gene und Proteine zu erhalten.

Kundenspezifische DNA-Microarrays

Microarray-Technologie
© Fraunhofer IGB

Das Fraunhofer IGB entwickelt für Kunden aus Unternehmen, Kliniken und Forschungseinrichtungen individuelle Microarrays mit maßgeschneiderten Erregerpanels.

Die vorhandene Infrastruktur ermöglicht es, individuell angepasste Microarrays vom Design der Sonden bis hin zu deren Immobilisierung mittels Kontaktprintverfahren zu entwickeln.

 

Indikationen

  • Sepsis
  • Respiratorische Erkrankungen
  • Hautinfektionen
  • Sexuell übertragbare Erkrankungen
  • Resistenznachweis
  • Gemischte Panels mit Bakterien, Pilzen, Protozoen und Viren

Leistungsangebot

Unser Angebot umfasst den gesamten Workflow der Array-Entwicklung: vom Sondendesign, über deren Immobilisierung im Kontaktprintverfahren bis hin zur Hybridisierung von Target-DNAs zur Fluoreszenz-basierten Identifikation der Erreger.

  • Entwicklung kundenspezifischer DNA-Microarrays
  • DNA-Sondendesign
  • Spotting
  • Hybridisierung von Target-DNAs
  • Signalauswertung
  • Automatisierte Herstellung von Microarrays mit einem Spotter

Ausgewählte Publikationen

  1. Lagorce, A., Hauser, N. C., Labourdette, D., Rodriguez, C., Martin-Yken, H., Arroyo, J., Hoheisel, J. D., and Francois, J. (2003) Genome-wide analysis of the response to cell wall mutations in the yeast Saccharomyces cerevisiae, J Biol Chem 278, 20345-20357.
  2. Sohn, K., Urban, C., Brunner, H., and Rupp, S. (2003) EFG1 is a major regulator of cell wall dynamics in Candida albicans as revealed by DNA microarrays, Mol Microbiol 47, 89-102.
  3. Lotz, H., Sohn, K., Brunner, H., Muhlschlegel, F. A., and Rupp, S. (2004) RBR1, a novel pH-regulated cell wall gene of Candida albicans, is repressed by RIM101 and activated by NRG1, Eukaryot Cell 3, 776-784.
  4. Fellenberg, K., Busold, C. H., Witt, O., Bauer, A., Beckmann, B., Hauser, N. C., Frohme, M., Winter, S., Dippon, J., and Hoheisel, J. D. (2006) Systematic interpretation of microarray data using experiment annotations, BMC Genomics 7, 319.
  5. Hauser, N. C., Martinez, R., Jacob, A., Rupp, S., Hoheisel, J. D., and Matysiak, S. (2006) Utilising the left-helical conformation of L-DNA for analysing different marker types on a single universal microarray platform, Nucleic Acids Res 34, 5101-5111.
  6. Sohn, K., Senyurek, I., Fertey, J., Konigsdorfer, A., Joffroy, C., Hauser, N., Zelt, G., Brunner, H., and Rupp, S. (2006) An in vitro assay to study the transcriptional response during adherence of Candida albicans to different human epithelia, FEMS Yeast Res 6, 1085-1093.
  7. Wilson, D., Tutulan-Cunita, A., Jung, W., Hauser, N. C., Hernandez, R., Williamson, T., Piekarska, K., Rupp, S., Young, T., and Stateva, L. (2007) Deletion of the high-affinity cAMP phosphodiesterase encoded by PDE2 affects stress responses and virulence in Candida albicans, Mol Microbiol 65, 841-856.
  8. Hauser, N. C., Dukalska, M., Fellenberg, K., and Rupp, S. (2009) From experimental setup to data analysis in transcriptomics: copper metabolism in the human pathogen Candida albicans, J Biophotonics 2, 262-268.
  9. Hartmann, S. C., Kumar, Y., Lemuth, K., Rohde, B., Knabbe, C., Weile, J., Bauser, C., Hauser, N. C., Schöck, U., and Rupp, S. (2010) Schnelle molekulare Sepsis-Diagnostik - Ein Biochip für die schnelle Pathogenidentifizierung und Resistenzcharakterisierung, In GIT Labor-Fachzeitschrift, pp 824-825.
  10. Dally, S., Lemuth, K., Kaase, M., Rupp, S., Knabbe, C., Weile, J. (2013) DNA-microarray for genotyping antibiotic resistance determinants in Acinetobacter baumannii clinical isolates. Antimicrob. Agents Chemother. 57, 4761–4768.

Unsere Entwicklung: Innovative Plattform zur Pathogenerkennung in der Lebensmittelproduktion

Microarray
© Fraunhofer IGB
Inhouse-Herstellung eines Prototyps zum molekularen Nachweis von Insektenpathogenen
DNA-Microarray
© Fraunhofer IGB
Detektion der Erreger durch Fluoreszenzsignale

Pathogene wie Bakterien, Viren und Pilze richten in der Lebensmittelproduktion, Landwirtschaft und Aquakultur erhebliche Schäden an, mit Verlusten in Milliardenhöhe [1]. Besonders Nischenmärkte wie Insektenzucht, Fischzuchten und Shrimps-Tierhaltung [2] sind betroffen, wo fehlende oder teure Diagnostik die Rentabilität gefährdet [3].

Neue Fraunhofer DNA-Array-Plattform

Unsere neue Fraunhofer DNA-Array-Plattform bietet eine schnelle, kostengünstige und anpassbare Lösung, die Erträge schützt und Lebensmittelsicherheit gewährleistet – von Wareneingangsprüfung bis Qualitätssicherung. Die Plattform wurde im Rahmen des Fraunhofer-Leitprojekts FutureProteins zur automatisierten Überwachung für das Insektenfarming von den Fraunhofer-Instituten IGB, IME und IVV entwickelt.

Effizientes Nachweissystem von Pathogenen durch molekularen Nachweis

Das Nachweissystem ist

  • hochspezifisch für pathogene Keime
  • automatisiert, digital und hochdurchsatzfähig
  • und liefert zeitnah direkt vor Ort Ergebnisse.

Damit stellt es eine kostengünstige Alternative zu klassischen kulturabhängigen Verfahren oder metagenomische Ansätze dar, die teuer, aufwendig sowie langwierig und für tägliche Routineinspektionen nicht geeignet sind. 

Funktionsprinzip der neuen Plattform zur Pathogenerkennung: Schneller DNA-basierter Nachweis von Viren, Bakterien und Pilzen

Auf Basis einer isothermalen Amplifikationstechnik werden DNA-Signaturen potenzieller Erreger aus Probenmaterial via PCR vervielfältigt, dabei fluoreszenzmarkiert und im Anschluss über eine spezifische, immobilisierte Sonde gebunden. Das dabei erzeugte Signal wird optisch ausgelesen und anhand einer einfachen Matrix ausgewertet. Diese Technik erlaubt eine deutlich einfachere Handhabung als die bisher gängigen PCR-Anwendungen.

© Fraunhofer IGB
Für das multiparallele Nachweissystem von Pathogenen werden spezifische DNA-Sequenzen unterschiedlicher Infektionserreger vervielfältigt, fluoreszenzmarkiert und über eine Sonde auf einem Microarray fixiert.

Partner zur Weiterentwicklung gesucht

Das System wurde erfolgreich im Labormaßstab getestet und ist bereit für den Transfer in die in die industrielle Anwendung. Werden Sie Partner in weiterführenden Projekten!

Einsatz in der Produktion von Lebensmitteln und Futtermitteln

Die Fraunhofer DNA-Array-Plattform eignet sich zur Qualitätskontrolle und zur Qualitätssicherung für Betriebe der Lebensmittel- und Futtermittelproduktion und adressiert die Herausforderungen auch von Nischenmärkten durch eine vielversprechende, universelle Diagnostik.

  • Aquakultur
  • Shrimps-Tierhaltung 
  • Fischzucht
  • Insektenzucht
  • Landwirtschaft
© Fraunhofer IVV
IVV-Detektor

Vorteile

  • Verhindert Produktionsausfälle: Ergebnisse in nur 4 Stunden ermöglichen schnelle Wareneingangsprüfungen und Qualitätskontrollen, z. B. für Futtermittel, und stoppen kontaminierte Lieferungen sofort
  • Erhöht die Lebensmittelsicherheit: Multiplex-PCR erkennt bis zu 11 Pathogene (z. B. Salmonella, Vibrio) gleichzeitig, sichert Produktqualität und schützt das Markenimage
  • Kostengünstige Tests machen regelmäßige Kontrollen für Kleinbetriebe erschwinglich
  • Skalierbar und einfach: Von 1 bis 96 Wells, händisch oder automatisiert, ohne Fachkräfte, spart Arbeitszeit in kleinen Fischzuchten oder großen Produktionsstätten
  • Minimaler Invest: IVV-Detektor für nur 1.500 €

Unsere Fraunhofer DNA-Array-Plattform (TRL 5-6) ist schnell, kostengünstig und präzise und bietet eine universelle Lösung für die Erkennung von Bakterien, Viren und Pilzen.

 

Multiplex-PCR-Reaktion

  • Amplifiziert bis zu 11 Pathogen-Targets (z. B. Salmonella, Vibrio, Listeria) gleichzeitig in einer einzigen Reaktion durch optimierte Primer-Sets
  • Reduziert den Reagenzienverbrauch um bis zu 80 Prozent 
  • Minimiert die benötigte Zeit (2 Stunden Thermocycling) im Vergleich zu Singleplex-PCR

Fluoreszenzauslese-Array

  • Amplifizierte DNA wird mit hochspezifischen, fluoreszenzmarkierten Sonden (Wellenlängenbereich 450–650 nm) hybridisiert und in ANSI-kompatiblen 96-Well-Platten detektiert
  • Hochauflösende Fluoreszenzsignale ermöglichen präzise Pathogen-Identifikation in nur 4 Stunden

Kontaminationsprävention 

  • Eine integrierte enzymatische Dekontamination eliminiert Fremd-DNA, reduziert Fehlpositive und sichert zuverlässige Ergebnisse

Patentierter Assay

  • Bioinformatisch optimierter Assay gewährleistet maximale Spezifität für lebensmittelrelevante Pathogene
  • Einzigartige Sequenzdesigns schützen vor Kreuzreaktionen

Integrierte Prozesskontrolle

  • Automatische Validierung durch interne Kontrollsequenzen in jeder Reaktion überwacht Extraktion, Amplifikation und Hybridisierung

Einfache Bedienung und Dokumentierung

  • Intuitives 7-Zoll-Touchscreen-Interface steuert den Workflow von der Probenvorbereitung bis Analyse und
  • speichert Ergebnisse automatisch in einem digitalen Log (exportierbar als CSV/PDF).

  1. Food and Agriculture Organization of the United Nations. (2019). New standards to curb the global spread of plant pests and diseases. FAO Newsroom. https://www.fao.org/newsroom/detail/New-standards-to-curb-the-global-spread-of-plant-pests-and-diseases/en
  2. Kumar, S., Panda, S. K., & Behera, B. (2025). Unveiling the economic burden of diseases in aquatic animal food production in India. Frontiers in Sustainable Food Systems, 9, 1480094. https://doi.org/10.3389/fsufs.2025.1480094
  3. Eilenberg, J., Vlak, J. M., Nielsen-LeRoux, C., Cappellozza, S., & Jensen, A. B. (2021). Diseases in edible insect rearing systems. Journal of Insects as Food and Feed, 7(5), 621–638. https://doi.org/10.3920/JIFF2021.0024
  4. Deka, R., Marsh, T. L., Aslimwe, G., Brough, E., Rushton, J., & van Wesenbeeck, L. (2024). Quantifying cost of disease in livestock: A new metric for evaluating the impact of disease in smallholder and extensive livestock systems. The Lancet Planetary Health, 8(4), e224–e233. https://doi.org/10.1016/S2542-5196(24)00047-0
  5. Quelle 1: Law, J. W.-F., Ab Mutalib, N.-S., Chan, K.-G., & Lee, L.-H. (2015). Rapid methods for the detection of foodborne bacterial pathogens: Principles, applications, advantages and limitations. Frontiers in Microbiology, 5, 770. https://doi.org/10.3389/fmicb.2014.00770 

Referenzprojekte

Fraunhofer-Leitprojekt FutureProteins

 

Fraunhofer verfolgt im Leitprojekt FutureProteins das Ziel, zukunftsweisende Technologien, um Pflanzen-, Pilz-, Insekten- und Algenproteine für die Herstellung von Nahrungsmitteln nutzbar zu machen. Für das automatisierte Insect Farming etablieren wir ein molekulares Nachweissystem für Insektenpathogene.

 

Laufzeit: Januar 2021 – Dezember 2024

STD-Array – Identifizierung von Erregern sexuell übertragbarer Erkrankungen durch hochparallele molekulare Diagnostik mittels DNA-Microarray

Im Auftrag der Immundiagnostik AG Bensheim entwickelt das Fraunhofer IGB Multiplex-PCRs als Grundlage für DNA-basierte Microarrays zur hochparallelen Diagnostik von sexuell übertragbaren Infektionserkrankungen. Die automatisierte Bearbeitung der Proben soll dabei eine vereinfachte und kostengünstige Diagnostik in einem Point-of-Care-Test ermöglichen.

Laufzeit: 2017

FYI-Chip – Nachweis humanpathogener Hefe- und Schimmelpilze im Lab-on-a-Chip

 

Im Rahmen des vom BMBF geförderten Forschungsvorhabens »FYI-Chip – Fungi Yeast Identification« soll ein vollintegriertes Lab-on-a-Chip-System zur schnellen Bestimmung von Hefe- und Schimmelpilzinfektionen in respiratorischen Sekreten und primär sterilen Körperflüssigkeiten bei immunsupprimierten Patienten enwickelt werden.

 

Laufzeit: April 2011 – März 2014

Therapiebegleitende Diagnostik von Brustkrebs mit DNA-Chips

 

Der am Fraunhofer IGB erprobte Biochip enthält eine gezielt ausgewählte Kombination mehrerer hundert Gene zur Charakterisierung von Mammakarzinomen.

Entwicklung einer DNA-Microarray-basierten Diagnostik zum schnellen Nachweis von Sepsis

 

In diesem Projekt entwickeln wir eine DNA-Microarray-Plattform, mit der sowohl pathogene Mikroorganismen (Bakterien und Pilze) als auch deren relevante Resistenzen detektiert und identifiziert werden können. Um die Sensitivität der Chips zu erhöhen, setzen wir auch proprietäre, mit Nanopartikeln beschichtete Oberflächen ein.

 

Laufzeit: März 2007 – August 2010

FunPath – Genomweite Ansätze zur Aufklärung der molekularen Pathogenitätsmechanismen des Humanpathogens Candida glabrata

 

Laufzeit: Februar 2007 - Juni 2010

EURESFUN – EUropean RESistance FUNgal

 

Im EU geförderten Verbundprojekt EURESFUN wird am Fraunhofer IGB ein DNA-Microarray entwickelt, um humanpathogene Pilze schnell und treffsicher nachweisen zu können.

 

Laufzeit: Dezember 2005 – November 2008